由具有工程化酪氨酸酶表达的纤维素生产细菌培育而成的自着色纺织品

雷蒂克雷氏菌 培养条件和培养方法 本研究使用两种培养基进行培养 雷蒂克雷氏菌。 HS-葡萄糖培养基(2% 葡萄糖,10 g l−1 酵母提取物,10 克/升−1 蛋白胨,2.7 克/升−1 已经2羟基磷灰石4 和 1.3 克/升−1 柠檬酸,pH 5.6–5.8)和椰子水介质(椰子水 (Vita Coco),0.05% (vol/vol) 乙酸)。 椰子水介质通过过滤进行灭菌,需要超过 1 升的情况除外。 在这些情况下,培养基补充剂单独灭菌,并在培养容器中与椰子水混合,椰子水已用无菌技术打开并倒出。 什么时候 雷蒂克雷氏菌 在固体培养基上培养时,始终使用 HS-葡萄糖培养基并补充 1.5% 琼脂。 雷蒂克雷氏菌 液体培养分为以下两种不同的方法:振荡培养和静止培养。 在振荡培养中,使用的培养基补充有 2%(体积/体积)纤维素酶(Sigma-Aldrich,C2730),以允许混浊生长而不会结块。 在静态培养中,目标是形成薄膜,培养基中将补充 1%(体积/体积)乙醇以增强薄膜产量。 在这两种方法中,当质粒维持需要抗生素时,培养基中添加了 340 μg/ml−1 氯霉素或200 μg ml−1 奇霉素。 为了促进接种多个薄膜时的一致性, 雷蒂克雷氏菌 细胞在摇动生长条件下生长直至浑浊,OD 标准化600 穿过样品,通过离心沉淀并在随后的介质中洗涤以去除纤维素酶。 将洗涤后的细胞作为预培养物,以1:25的比例添加到培养容器中,并在30°C下静置以形成薄膜。 在一致形成大薄膜的情况下(>25 cm2),使用甘油等分试样方法。 这 雷蒂克雷氏菌 […]